表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞
表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞用于體外培養(yǎng)、傳代及鑒定表達(dá)SV40T抗原的人胚腎上皮細(xì)胞,同時(shí)可輔助定量檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)過程中相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)水平。該細(xì)胞源自人胚腎上皮組織,經(jīng)SV40病毒大T抗原(SV40T)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,保留人胚腎上皮細(xì)胞典型形態(tài)(多邊形、鋪路石樣)及生理特性,同時(shí)具備永生化增殖能力,可穩(wěn)定表達(dá)SV40T抗原,廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)、病毒包裝、藥物篩選、信號(hào)通路調(diào)控及腎臟生理病理相關(guān)研究,是細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、生物制藥等科研方向的核心實(shí)驗(yàn)材料,為相關(guān)研究提供標(biāo)準(zhǔn)化、穩(wěn)定的細(xì)胞培養(yǎng)與鑒定工具,助力科研工作高效推進(jìn)。
檢測(cè)/培養(yǎng)原理
本試劑盒結(jié)合細(xì)胞培養(yǎng)優(yōu)化體系與雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)原理,用于該類細(xì)胞的體外培養(yǎng)、傳代及相關(guān)標(biāo)志物檢測(cè)。細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)節(jié),利用專用優(yōu)化培養(yǎng)基模擬人胚腎上皮細(xì)胞生理微環(huán)境,添加適配永生化細(xì)胞的營養(yǎng)成分、生長(zhǎng)因子及抗生素,維持細(xì)胞原有形態(tài)特征、永生化增殖能力及SV40T抗原穩(wěn)定表達(dá),支持細(xì)胞長(zhǎng)期傳代培養(yǎng);標(biāo)志物檢測(cè)環(huán)節(jié),將抗該類細(xì)胞特異性標(biāo)志物(如上皮細(xì)胞標(biāo)志物CK18、CK19,SV40T抗原特異性抗體)包被于微孔板,加入細(xì)胞培養(yǎng)上清或細(xì)胞裂解液后,樣本中的目標(biāo)標(biāo)志物與包被抗體特異性結(jié)合,再加入酶標(biāo)檢測(cè)抗體形成夾心復(fù)合物,經(jīng)洗滌、顯色后,通過酶標(biāo)儀測(cè)定OD值,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線實(shí)現(xiàn)標(biāo)志物的定量檢測(cè),輔助驗(yàn)證細(xì)胞純度、活性及SV40T抗原表達(dá)水平,同時(shí)可監(jiān)測(cè)細(xì)胞增殖、藥物干預(yù)及基因調(diào)控后的標(biāo)志物表達(dá)變化。
產(chǎn)品特點(diǎn)
本試劑盒具有特異性強(qiáng)、細(xì)胞存活率高、操作簡(jiǎn)便、穩(wěn)定性好、適用性廣等核心特點(diǎn)。試劑盒配套的培養(yǎng)基經(jīng)過嚴(yán)格優(yōu)化,可特異性維持該類細(xì)胞的永生化特性及SV40T抗原穩(wěn)定表達(dá),有效抑制雜細(xì)胞污染,保障細(xì)胞純度;優(yōu)化培養(yǎng)基可維持細(xì)胞長(zhǎng)期穩(wěn)定增殖,減少形態(tài)變異及抗原表達(dá)丟失,細(xì)胞存活率可達(dá)90%以上,滿足長(zhǎng)期傳代、病毒包裝、藥物篩選等實(shí)驗(yàn)需求;操作流程簡(jiǎn)潔,無需復(fù)雜實(shí)驗(yàn)設(shè)備,遵循常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)與ELISA操作步驟即可完成,降低實(shí)驗(yàn)門檻;批內(nèi)、批間一致性高,試劑活性穩(wěn)定,可有效保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的重復(fù)性;適配該類細(xì)胞的體外培養(yǎng)及CK18、SV40T抗原等標(biāo)志物的檢測(cè),同時(shí)可用于基因轉(zhuǎn)染、病毒包裝、藥物敏感性檢測(cè)、信號(hào)通路研究等相關(guān)實(shí)驗(yàn),適用范圍廣泛。
適用樣本類型
可用于該細(xì)胞的體外培養(yǎng)、傳代,以及該細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞上清、細(xì)胞裂解液的相關(guān)標(biāo)志物(含SV40T抗原)檢測(cè)。(具體細(xì)胞培養(yǎng)、傳代及標(biāo)志物檢測(cè)細(xì)節(jié)請(qǐng)參考產(chǎn)品說明書)
該類細(xì)胞復(fù)蘇、培養(yǎng)時(shí)需嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范,避免細(xì)胞污染;細(xì)胞復(fù)蘇需嚴(yán)格控制解凍速度(37℃快速解凍),避免溫度驟變導(dǎo)致細(xì)胞損傷;細(xì)胞培養(yǎng)過程中,需定期更換培養(yǎng)基,保持培養(yǎng)環(huán)境清潔,控制適宜的溫度(37℃)、濕度及CO?濃度(5%),避免細(xì)菌、真菌污染;細(xì)胞傳代時(shí)需控制消化時(shí)間,避免消化過度導(dǎo)致細(xì)胞死亡;細(xì)胞上清與細(xì)胞裂解液樣本需離心去除雜質(zhì)后分裝保存,所有樣本需于-20℃密封保存,檢測(cè)前恢復(fù)至室溫并充分混勻,保障檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性;同時(shí)需做好細(xì)胞傳代標(biāo)記,避免混淆不同代次細(xì)胞,定期檢測(cè)SV40T抗原表達(dá)水平,確保細(xì)胞特性穩(wěn)定。
儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)
儲(chǔ)存條件
試劑盒需于2~8℃避光密封保存,其中細(xì)胞培養(yǎng)基需避光保存,避免營養(yǎng)成分及生長(zhǎng)因子降解;細(xì)胞凍存液需單獨(dú)冷凍保存,嚴(yán)格遵循凍存流程;未用完的試劑需按要求密封存放,防止污染與活性喪失;從冰箱取出后需在室溫平衡30分鐘以上再進(jìn)行使用,避免溫度驟變影響試劑活性與該類細(xì)胞的貼壁、增殖效果,同時(shí)防止SV40T抗原表達(dá)丟失。
注意事項(xiàng)
1. 所有實(shí)驗(yàn)操作需嚴(yán)格遵循無菌規(guī)范,實(shí)驗(yàn)器具需提前滅菌處理,避免污染影響細(xì)胞培養(yǎng)與檢測(cè)結(jié)果;
2. 消化試劑需現(xiàn)配現(xiàn)用,嚴(yán)格控制消化時(shí)間與溫度,避免消化過度導(dǎo)致細(xì)胞損傷或消化不足影響細(xì)胞分離效果;
3. 該類細(xì)胞復(fù)蘇、傳代需嚴(yán)格控制操作流程,解凍速度、消化時(shí)間及培養(yǎng)條件需符合說明書要求,避免細(xì)胞損傷或SV40T抗原表達(dá)丟失;不同代次細(xì)胞需做好標(biāo)記,防止混淆,同時(shí)定期檢測(cè)細(xì)胞純度及SV40T抗原表達(dá)水平,保障實(shí)驗(yàn)可靠性;
4. 實(shí)驗(yàn)操作需嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范,妥善處理廢棄組織、細(xì)胞及試劑,操作相關(guān)試劑時(shí)需做好個(gè)人防護(hù)措施。
訂購信息
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以上信息僅供參考,具體請(qǐng)已產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。