NCI-H520 (人肺鱗癌細(xì)胞)是由A.F. Gazdar等在1982年從一名肺鱗狀細(xì)胞癌患者的肺標(biāo)本中提取的，呈上皮細(xì)胞樣，為貼壁細(xì)胞。

細(xì)胞培養(yǎng)信息：

細(xì)胞名稱：NCI-H520 (人肺鱗癌細(xì)胞)

細(xì)胞別稱：H520; H-520; NCI-HUT-520; NCIH520

細(xì)胞來源：肺癌

生長特性:  貼壁細(xì)胞、上皮細(xì)胞樣

培養(yǎng)條件:  1640+10%FBS

培養(yǎng)環(huán)境:  空氣，95%；二氧化碳 (CO2)，5%

細(xì)胞含量：>1×10? 細(xì)胞數(shù)

細(xì)胞規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

細(xì)胞用途：僅供科研使用。

NCI-H520細(xì)胞培養(yǎng)注意事項：

① 該細(xì)胞呈島狀聚集生長，控制消化時間尤為重要：消化時間過短時，細(xì)胞不易從瓶（皿）壁脫落，吹打過度會導(dǎo)致細(xì)胞碎裂增多，吹散不開的細(xì)胞團(tuán)塊也會導(dǎo)致細(xì)胞堆積影響生長；消化時間過長也可能導(dǎo)致細(xì)胞傳代后漂浮增多；建議每隔一分鐘顯微鏡下觀察細(xì)胞消化狀態(tài)，確認(rèn)細(xì)胞與細(xì)胞間明顯分離有間隙時再終止消化，使細(xì)胞盡量分散，避免聚團(tuán)。

② 消化傳代時，吹打細(xì)胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免造成細(xì)胞碎裂增多；

③ 該細(xì)胞生長過程中，培養(yǎng)基中始終有少量漂浮的細(xì)胞碎片，背景中可看到少量黑點，換液可暫時改善，但繼續(xù)培養(yǎng)仍會出現(xiàn)無法避免。以上都是常見現(xiàn)象，不影響細(xì)胞增殖和實驗；

④ 細(xì)胞生長偏慢時，可以提高5~10%血清濃度（血清總濃度不超過 20%）培養(yǎng)一段時間，待細(xì)胞狀態(tài)和生長速度恢復(fù)正常后換回正常血清濃度。

⑤ 該細(xì)胞貼壁展開較慢，復(fù)蘇24 h后，大部分細(xì)胞呈不規(guī)則多邊形或圓形，細(xì)胞形態(tài)未完Q展開，48 h后可見細(xì)胞開始成片聚集生長；新復(fù)蘇培養(yǎng)細(xì)胞，可見較多漂浮，復(fù)蘇48 h內(nèi)可先不換液，保留漂浮細(xì)胞繼續(xù)貼壁；

⑥ 該細(xì)胞生長速度中等，細(xì)胞匯合度達(dá)到80%以上時即可傳代，1:2傳代約2~3天可再次傳代，1:3傳代約3~4天可再次傳代；

運輸和保存：

1、1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

2、T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。